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| 產地 | 進口、國產 | 
| 保存條件 | 低溫冷藏 | 
| 品牌 | 帛科 | 
| 貨號 | AE0763 | 
| 用途 | 公司產品僅用于科研 | 
| 組織來源 | |
| 細胞形態 | 懸浮 | 
| 是否是腫瘤細胞 | 否 | 
| CAS編號 | |
| 保質期 | 詳見說明書 | 
| 器官來源 | 詳見說明書 | 
| 免疫類型 | 詳見說明書 | 
| 品系 | 詳見說明書 | 
| 生長狀態 | 詳見說明書 | 
| 物種來源 | |
| 包裝規格 | |
| 純度 | % | 
| 是否進口 | 是 | 
基本特性:
 ( 1 )組織來源于正常人肺組織。
 ( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
 ( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
 ( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
 ( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
 ( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
 公司產品僅用于科研
 中文名稱: 扁桃體平滑肌細胞特價
 簡稱:扁桃體平滑肌細胞
種屬:
來源:
培養基:
狀態:
產品規格:
單位:
貨號:AE0763
 
 使用方法:
 收到細胞扁桃體平滑肌細胞特價后,請按照以下方法進行操作。
 1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
 3. 細胞傳代
 1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
 4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

 實驗操作:
 1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
 2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
 3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
 4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
 5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
 6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
 7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
 8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
 9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
 10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
操作規程:
 一.培養基及培養凍存條件準備:
 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
 二.細胞處理:
 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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