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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3950 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Louping Ill VirusRTPCR
【貨號(hào)】: BKP3950
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 溴綠-甲基紅指示劑芬枕，英文名或英文縮寫：metxyl Red mixed indicator powder，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：100克
人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢炳1(Z)-異構(gòu)體 Cqfprozil (Z)-IsoMqr 1141-77-9
SK-MEL-1細(xì)胞，人皮膚色素瘤細(xì)胞 德氏乳桿菌乳酸亞種 人十二脂腸腺癌;HuTu-80GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH鹽酸胍技術(shù)級(jí)白色至微黃色顆粒結(jié)晶粉末RTsigma
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)EDTA-2K乙二安四乙酸鉀25克高，73%
KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 69610-40-8Boc-L-脯醇(S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinemetxanol
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸奈福泮（標(biāo)準(zhǔn)品）Nefopam HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定
LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細(xì)胞)甲睪酮; 甲基素（標(biāo)準(zhǔn)品）17-Methyltestosterone質(zhì)量規(guī)格：含量測定
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml布美他尼;丁苯氧酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Bumetanide質(zhì)量規(guī)格：含量測定
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氨甲環(huán)酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Tranexamic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1氨甲環(huán)酸Tranexamic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)多沙普侖Doxapram質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
BGC-803(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1奧沙利鉑（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxaliplatin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞HIBEpiC硝酸奧昔康唑Oxiconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格：度>99%
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸土霉素Oxytetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2鹽酸土霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Oxytetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測定
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書PG細(xì)胞，人肺巨細(xì)胞癌 小鼠巨噬細(xì)胞,Ana-1細(xì)胞 CM-R119大鼠晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLR-羥基托吡酯質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口R-Hydroxy Topiramate
RWPE1(人上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2S-羥基托吡酯質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口S-Hydroxy Topiramate
Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kitD-鹽酸伐昔洛韋質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口D-Valacyclovir Hydrochloride
人雪旺細(xì)胞總RNAHSC NA伐昔洛韋雜質(zhì)F質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Valacyclovir Impurity F
小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(MM)(5×105)4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4,5-Difluorophthalonitrile
PCR檢測試劑盒
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
